Hromadný chov šněrování obyčejný

V současné době existuje řada technologií pro hromadné šněrování běžných šněrování. Všechny šlechtitelské technologie tohoto predátora poskytují velké množství tohoto entomofága za relativně nízké náklady. Masivní rozmnožování běžných šněrování zahrnuje následující technologické operace: získávání potravy pro šněrovací krajky (vejce obilných můr nebo jiných hmyzů, stejně jako umělá živná média), inkubační vejce dravců, individuální nebo skupinové chování šněrovacích čipů, chov dospělého hmyzu, získávání vajec, hromadění a ochrana biomateriálů. Podle environmentálních parametrů druhu je v každé fázi technologie chovu nutné vytvořit určité podmínky teploty a vlhkosti a poskytnout entomofágu vysoce kvalitní jídlo. Nejvíce průmyslová biolaboratory šněrovaná krajky používat vejce obilného můra jako potrava pro larvy (Sitotroga cerealella

Chov běžných šněrování na vejcích zrna můry

Četné studie domácích i zahraničních vědců prokázaly, že vejce zrnná můra jsou úplnou náhradou za přirozené krmivo larev dravců. Pro krmení larev se obvykle používají jak životaschopná (čerstvá) vejce sitrogenu, tak vejce, která ztratila životaschopnost v důsledku svého dlouhého skladování při nízkých teplotách. Bylo zjištěno, že jejich nutriční hodnota neklesá ani při dlouhodobém skladování (až do tří měsíců). To vám umožní akumulovat je.

Hromadné šněrování běžných vajec obilných můr se provádí jak v laboratoři, tak i mechanizovaným způsobem pomocí speciálního průmyslového vybavení.

Laboratorní metoda hromadného šlechtění běžných šněrování

Technologie pro laboratorní šlechtění šněrování zahrnuje následující operace: získání děložní kultury šněrování, inkubace vajíček, individuální nebo skupinové odchov larvů, získání dravých kokonů, chov dospělého hmyzu a skladování biomateriálů.

Kultura děložního šněrování

Laboratorní šlechtění začíná získáváním děložního materiálu, který lze získat v jiných biologických laboratořích nebo biofaktorech nebo přímo odebrat v přírodě. Sběr krajek se nejlépe provádí na konci léta, chytáním dospělého hmyzu do světla, včetně ultrafialového záření, nebo sečením motýlí sítí v polních plodinách, kde se mšice nachází v mase, nebo třepáním v motýlí síti ze dřeviny. Před zimou se dospělí vyskytují v ovocných plodinách, v zahradách a parcích, na stromech a keřech, kde žijí až do listopadu v zimě. Dospělé krajky shromážděné v druhé polovině října již začínají vstupovat do diapauzy a měnit svou barvu z intenzivní zelené na světle zelenou, a poté se snížením teploty změní na žlutozelenou barvu s hnědočervenými skvrnami na těle..

Inkubace vajec

Aby se získaly koevální larvy dravce, čerstvě položená (do 24 hodin) se vajíčka z krajky umístí do termostatu, kde procházejí inkubační dobou při teplotě 25 ° C a relativní vlhkosti 80. Vzhledem k tomu, že larvy laceworm vykazují velmi výrazný kanibalismus, den před tím, než se znovu narodí, tj. Dva dny po umístění na inkubaci, jsou vajíčka laceworm balena do speciálně vyrobených buněčných klecí pro individuální výchovu larev. Ten se skládá ze stohu vyrobeného ze silného papíru ve formě voštin, jehož dno je mlýnský plyn, napnutý přes dřevěný rám, a víko - skleněná deska. Po sestavení tvoří každá buňka v kombinaci se dnem a krytem izolovanou samostatnou zahradu o rozměrech 7 × 12–5,0 × 12,5 mm. Lze použít i jiné zahrady..

Připravená vejce jsou balena rozptýlením, za použití jednoduchého zařízení typu pepř, v množství dvou vajec na buňku. K naplnění jedné zahrady je zapotřebí asi 800 vajec, což odpovídá hmotnosti 34,8 mg.

Larva Care

Po celou dobu individuálního vývoje larev se krmí třikrát. Krmení larev červenohlavých se provádí dispergováním vajíček sitrogenu pomocí stejného zařízení jako při balení vajec laceworm.. První porce vajec zrna můry se zavádějí současně s entomofágovými vejci v dávce 2 mg na buňku. Potom je pokládka pokryta sklem a zahrada je umístěna v termostatu s teplotou 25 ° C. Druhé krmení larev provedeno po dosažení druhého věku, nebo pět dní po prvním. Až dosud byla jejich vířivost výrazně zvýšena, takže se dávka vajec zvýšila na 14 mg na buňku. Na rozdíl od prvního během druhého krmení jsou larvy predátorů před anestetizovány oxidem uhličitým a vejce sitotrog jsou rovnoměrně rozptýlena na sklenici předem naolejované medem a pokryta zahradním pokládáním. Pro urychlení této operace se doporučuje mít pro každou zahradu dvě sklenice. To vám umožní připravit jídlo na entomofágové larvy a během krmení vyměnit pouze sklo v zahradách. Připravené potravinové talíře se skladují v chladničce po dobu tří a více dnů..

Třetí porce vajec dejte, když larvy dosáhnou třetího věku, tj. tři dny po druhém. Množství vajec během tohoto období se zvýší na 16 mg na buňku nebo 6,4 g na zahradu. Při krmení larev červů pro dávkování krmiva je vhodné použít předem připravená odměrná opatření s kapacitou odpovídající prvnímu, druhému a třetímu krmení. Tři až pět dní po třetím krmení larvy dojdou a kuklí. Pokud dodržujete vzdělávací režim z každé zahrady, můžete získat 450 kokosových ořechů.

Navrhuje se skupinová metoda pro výcvik larev červů. V larvách prvního a druhého věku, s určitou hustotou kořisti a optimální teplotou a vlhkostí, as dostatečným množstvím potravy lze kanibalismus predátorů minimalizovat. Například při uchovávání entomofágových larev v běžných půllitrových nádobách po 100 jedincích lze získat až 91,7 larev v druhém instaru. Zvýšení hustoty šněrování vede ke zvýšení kanibalismu a jeho produkce prudce klesá. Skupinový způsob chovu larev červenohlavých je oprávněný pouze tehdy, jsou-li získány larvy druhého stupně. Pro získání imaga je tato metoda nepřijatelná, protože larvy třetího stupně jedí kukly.

Péče o dospělé a získávání vajec

Šest až sedm dní po vytvoření kokonů jsou přemístěny do speciálních klecí pro vzdělávání dospělého hmyzu. Zahrady jsou vyráběny ve formě válcových kontejnerů o průměru 30 cm a výšce stěny 10 cm. K jejich výrobě se používají vinylové plasty, střešní žehlička nebo jiný materiál. Jako dno se používá mlýnský plyn s velikostí ok 1,5 x 1,5 mm. Horní část zahrady je pokryta tmavou hustou látkou nebo papírem. Mlýnský plyn, papír nebo hadřík je zajištěn do zahrady pomocí obruče nabité speciálním šroubem. Na vnitřní straně stěn zahrady jsou umístěny držáky variabilních vinylových plastových desek, na které jsou aplikovány kapky krmení hmyzem. Každá zahrada může obsahovat až 200 dospělých predátorů. Velký dav hmyzu v zahradách vede ke snížení fecundity entomofágů. Bylo zjištěno, že se změnou v hustotě šněrování z 85 na 350 jedinců na zahradu úrodnost predátora klesá třikrát a při optimální hustotě začíná hromadné kladení vajíček hmyzem o 10-15 dní dříve než při vysoké hustotě.

Plodnost šněrování je do značné míry ovlivněna povahou krmiva imago. Nejvyšší reprodukční schopnost hmyzu je pozorována při krmení potravou se sacharidy a bílkovinami. Dravci mají vysokou plodnost, když krmí ženské krajky maltózou v kombinaci s fruktózou, nižší plodnost, když se do stravy dostávají glukóza a sacharóza, a když je sacharóza nahrazena cukrem, klesá plodnost hmyzu 1,5 až 2,0krát.

Med a cukrový sirup se obvykle používají jako zdroj uhlohydrátů pro krmení dospělých krajek a jako proteinové krmivo se používá pivovarský kvasnicový autolyzát. K výše uvedenému krmivu je dobré přidat 2% roztok včelího chleba. Přidání i malého množství včelího chleba do hmyzí stravy zvyšuje jejich životnost. Při krmení jednoho uhlohydrátu nebo bílkovinných potravin jsou biologické parametry entomofágu sníženy.

Technika krmení hmyzu spočívá v tom, že se med nebo kvasničný autolyzát nanáší na vnitřní stěny poutek ve formě řad střídavých kapek. Během prvních čtyř až pěti dnů se hmyz krmí pouze medem nebo cukrovým sirupem a poté autolyzátem medu a pivovarských kvasnic, z nichž každý se aplikuje samostatně. Vzdálenost mezi kapkami medu by měla být asi 3 cm. Autolyzát se nanáší na jazýčky každé dvě řady medu. Počet kapek medu v řadě po celé výšce záložky 10-12, kvasinky - 5-6.

Při výměně krmiva, aby se zabránilo šíření hmyzu, jsou anestetizováni. K tomu použijte speciální zařízení s nasáváním vzduchu (na spodní straně stolu je nainstalován běžný domácí ventilátor s otvorem vyříznutým podle průměru zahrady). Když je ventilátor zapnutý, hmyz se přitiskne proudem vzduchu na dno klece. V současné době se horní tkanina nebo papír s vejci položenými na nich odstraní a ušká se změní.

Vejce se sklízejí řezáním stonků s břitvou. Je však třeba mít na paměti, že v tomto případě asi 20 z nich zemře na mechanické poškození. Výhodnější metoda založená na rozpouštění stonků vajec v 0,8 roztoku chlornanu sodného. Aby se toho dosáhlo, papírová nebo tkaninová horní část klece s vejci z krajky se ponoří na 4 sekundy do vodného roztoku chlornanu sodného, ​​předem zahřátého na 24 ° C. Poté se papír nebo tkanina udržuje na vzduchu po dobu 16 sekund a vejce se promyjí proudem vody na silném sítu, vysuší se a použijí se podle plánu.

Lacewing skladování

Pro úspěšné použití šněrování je důležité akumulovat dostatečnou zásobu dravce, takže je-li to nutné, je možné uvolnit entomofág na velkých plochách. Za tímto účelem byla vyvinuta technika pro zachování čipky v různých fázích jejího vývoje..

Skladování vajec. Optimální podmínky pro skladování šněrovacích vajec jsou teplota 5 ° C a relativní vlhkost 80-90. K uchování jsou vhodná pouze čerstvá vejce. V závislosti na fázi embryonálního vývoje se stupeň přežití vajec během skladování liší. Nejvhodnější skladování vajec, pokud doba skladování není delší než 20 dnů. Během tohoto období zůstane životaschopných 76-96 embryí. Delší konzervace nemá praktickou hodnotu, protože většina vajec během této doby ztrácí svou životaschopnost. Takže při udržování vajíček do 30-35 dnů odumře 36-50 embryí.

Larvalské úložiště. Stejně jako vejce jsou laceworm larvy nevhodné pro dlouhodobou ochranu. Při nízkých teplotách se skladují po dobu 30–40 dní. Larvy prvního věku jsou k tomu vhodnější. Larvy druhého a třetího věku lze skladovat až 20 dní. Při delším skladování se jejich životaschopnost snižuje.

Ukládání kakaa. Zachovány jsou pouze ty kukly, ve kterých se tvoří kukly, tj. Sedm dní po vytvoření kokonu. Kokony s kukly se netvořily, ani při 10denním skladování zemřely (30–36). Pupa je skladován při teplotě 2 ° C a relativní vlhkosti 75 ° C. Největší dopad na jejich přežití však má doba skladování, která by neměla přesáhnout 10 dní. Delší pobyt při nízkých teplotách vede k významné smrti hmyzem. Pokud je tedy skladováno po dobu 20 dní, životaschopnost je zachována pouze u 41–52 kukel.

Uchovávání dospělých reprodukčních jedinců. Nejlepší podmínky pro zachování aktivního hmyzu dospělých je teplota 4 ° C a relativní vlhkost 70-90. Dospělé krajky se ukládají do kulatých sít nebo do skleněných pololitrů nebo litrových sklenic. Pro zvětšení celkové využitelné plochy je v bankách umístěn křížový průřez z kartonové lepenky, který rozděluje banku do čtyř sektorů.

Ke skladování se používá mladý hmyz (samci a samice). Do půllitrové nádoby se umístí až 200 hmyzů, v bankách s větší kapacitou se jejich počet zvyšuje podle objemu. Před zahájením skladování se hmyz krmí medem po dobu pěti až sedmi dnů. Během doby skladování entomofágů se pravidelně (jednou za pět dní) krmí medem nebo cukrovým sirupem. Hmyz určený ke skladování nedává kvasničný autolyzát. Tyto podmínky umožňují zajistit dlouhodobou uchování entomofágů (míra přežití 85-90) s uspokojivou reprodukční schopností. Mějte na paměti, že dlouhodobé skladování aktivních žen zkracuje jejich životnost.

Uchovávání šněrovacích očí pro dospělé. Běžné šněrování v životním cyklu má imaginární diapauzu, tato funkce se používá při ukládání hmyzu. Podmínky jsou pro ně předběžně vytvořeny (krátký den trvající 10-12 hodin po dobu 22-34 dnů), které jsou nezbytné pro indukci diapause do šněrování. Aby se urychlil proces přechodu hmyzu do stavu diapauzy, je v tomto období krmivo z potravy vyloučeno a krmeno pouze cukrovým sirupem. Během diapauzy, krajky nekládají vejce. Navenek od aktivní se liší barvou těla..

Řada šněrování je uchovávána při teplotě 5 ° C a relativní vlhkosti 70 ° C. Během skladování je hmyz neustále krmen směsí cukerného sirupu nebo medu z autolyzátu pivovarských kvasnic. To je nezbytné ke zvýšení plodnosti predátorů..

Drobný hmyz je vhodnější pro skladování než aktivní jedinci. I 150 dnů po skladování přežije více než 70 krajek a z vajíček, která položili, se regeneruje až 93 životaschopných larev. Hmyz se reaktivuje při světelné periodě 16 hodin a teplotě vzduchu nad 5 ° C.

Technologie mechanizovaného šlechtění běžných šněrování

Na základě mnohaletého laboratorního výzkumu vyvinuli zaměstnanci uzbeckého vědeckého výzkumného ústavu ochrany rostlin (Taškent) sadu zařízení (linku) pro hromadné šněrování šněrování. Sada zařízení se skládá z termostatického pokojového vybavení s řízenou mikroklimatem a tří kusů zařízení určených pro různé technologické operace v chovu šněrování.

Jmenování, technické údaje a princip činnosti zařízení pro hromadné pěstování šněrování běžné

Mechanizovaná linka je určena k hromadnému chovu běžných šněrování. Je namontován v laboratorních místnostech, ve kterých jsou elektrické sítě 220/380 V, 50 Hz střídavého proudu, vodovod, větrání, kanalizace.

Produktivita této mechanizované linky je 1,0 milionu vajíček pro šněrování denně. Hlavní složky mechanizované linie pro chov šněrování obyčejných a hlavní funkční ukazatele a účel jednotlivých částí jsou uvedeny v tabulka 1 a 2.

Tabulka 1

Hlavní složky linie hromadného chovu šněrování

Tabulka 2

Hlavními funkčními ukazateli jsou účel jednotlivých částí zařízení pro hromadné šněrování

Jednotka pro dávkování potravin pro larvy laceworm Je určen pro dávkování krmiva v hexelových buňkách, je to rám s nainstalovanou perforovanou napájecí nádrží.

Aby se všechny larvy laceworm vyvinuly přibližně ve stejnou dobu, inkubují se pouze čerstvě položená vejce. Vejce dravce jedné sbírky se smíchají s vejci sitotrog v poměru 5 mg sitotrogs na jedno vajíčko šněrovací a při výpočtu 17-20 g vajec sitotrog na hexel.

Dávkovači destička zajišťuje, že se do každé hexelové buňky přivádí 10 mg krmiva. Opakované obvaz 10 mg v každé buňce se provádí po šesti až osmi dnech v jednotce dávkování krmiva. Po 12 až 15 dnech se larvy po dokončení vývoje kuklí v buňkách hexelu. Dva až tři dny po vylíhnutí larev nebo 15 až 17 dní po snášce vajíček se hexel přemístí do rostliny k odstranění a sběru kokonů..

Zařízení pro odstraňování a shromažďování zámotků z krajky je navržen tak, aby odstranil a sbíral zámotky z krajky z hexelu obr. 1. Jednotka je vybavena elektrickým pohonem s dopravníkem z hexelů. Tlak v pneumatickém systému pro foukání kokonů do 3 až 4 atm. podporováno kompresorem. Ve spodní části dopravníku je kokosová pánev s plynovou mřížkou. Shromážděné kokony jsou umístěny v klecích pro odchod dospělých a jejich další údržbu.

Klimatická místnost Určeno pro chov dospělých a laceworm larv za optimálních vlhkostních podmínek. Měl by podporovat následující parametry: teplota vzduchu 26 ± 1 ° C, relativní vlhkost 70 ± 5, fotoperioda 10-18 h.

Technologický proces výroby krajek. Technologie mechanizovaného chovu šněrování sestává z následujících hlavních výrobních procesů:

1. Sběr přirozených entomofágových populací.
2. Příprava krmiva.
3. Obsah dospělého hmyzu v klecích nebo bankách.
4. Lacewing vejce kolekce.
5. Inkubace vajec líhně.
6. Jednotlivé rostoucí larvy v hexech.
7. Odstraňování a shromažďování zámotků z krajky.
8. Umístění kokonů do sklenic.
9. Reprodukce biomateriálu.
10. Skladování biomateriálů pro použití.

Dospělí z šněrování obsahují 150 kusů ve skleněných třílitrových nádobách. nebo ve speciálních klecích na 3,5 tis. ks. Banky nebo klece jsou umístěny na stojanech v termostatické místnosti s nastavitelnou fotoperiodou nebo v klimatické kabinetu. Optimální teplota šněrování je 24-26 ° C, relativní vlhkost vzduchu je 65-70. Entomofágový imago je denně napájen medem a pivovarským kvasinkovým autolyzátem. Ve sklenicích jsou položeny proužky tmavé bavlny, na které kladou vajíčka samičí krajky. Jsou-li krajky uchovávány v bankách každý druhý den, jsou na nich položeny proužky s vejci, jsou z nich odstraněny krajky a položeny čisté proužky, z části proužků jsou šněrovací vejce opatrně krájena nůžkami, ostatní vejce představují obchodovatelné produkty. Řezaná otevřená krajková vejce se smísí s vejci sitotrog v poměru 5 mg vaječných sitotrogů na jedno vajíčko laceworm a na základě 17-20 g vajec sitotrog smíchaných s vejci krajkové v uvedeném poměru se nalije na dávkovací destičku jednotky pro dávkování krmiva. Po naplnění dávky vajec krmivem do speciálního zařízení - hexelu, se uzavře víkem. Šestiúhelníky jsou umístěny na speciálních stojanech (obr. 2) v termostatické místnosti s nastavitelnou fotoperiodou při teplotě 24-26 ° C, kde obsahují po dobu 15-17 dnů.

Sedm dní po snášce se provede druhé krmení larev červů, s dávkou 17-20 g vajíček sitotrog na hexel. Po 15–17 dnech se otevřou kryty hexů a v zařízení se odeberou kokony laceworm pro odstranění kokonů (obr. 1) a 150 ks. v bankách nebo klecích. Larvy, které neměly čas kukat, se umístí do zkumavek po 1 vzorku. a krmit sitotrogs vejci, až oni budou pupate. Po zahájení odjezdu imaga se proces reprodukce opakuje. Jednou za čtyři až pět dní se banky od dospělých z krajek nahrazují čistými, protože larvy se regenerují z vajec položených na stěnách plechovek, vykazují kanibalismus a jedí čerstvě položená vejce entomofága.

Chov běžných šněrování na umělých živných médiích

Nejslibnějšími krmnými substráty pro běžné laceworm larvy jsou mikroenkapsulované živné médium, které z hlediska fyzikálních vlastností a biochemického složení napodobuje přirozenou potravu dravce.

Byla vyvinuta formulace několika kapalných umělých živných médií pro výcvik larev červů a zařízení pro balení živných médií do mikrokapslí. Použití mikroenkapsulovaných umělých kultivačních médií umožňuje snížit náklady na vejce zrn zrna o 90-92 a výrazně snížit celkové náklady na chov šněrování.

Druhy umělých živných médií a technologie pro jejich přípravu

Je známo, že běžné šněrování se nejúčinněji používá při biologické kontrole mšic ve fázi larev druhého stupně. K výživě larev se používá několik typů kultivačních médií (tab. 3).

Tabulka 3

Formulace umělých živných médií pro larvy lacewing obyčejné

Živná média (I-III) se doporučují pro krmení larev od okamžiku znovuzrození do prvního moltu a na začátku druhého věku. Tato prostředí jsou zcela zaměnitelná a používají se v závislosti na přítomnosti určitých složek v biologické laboratoři. Středa IV se doporučuje pro výcvik larev červů ve druhém a třetím století při reprodukci laboratorních populací krajek.

Získání enzymatického hydrolyzátu kaseinu

Příprava 2. roztoku kaseinu. Kasein (30 g) byl míchán s 1500 ml 0,01 N roztoku KOH při 40 ° C po dobu tří hodin. Hodnota pH se monitoruje každých 15 minut a udržuje se v pH 8 přidáním 0,1 n KOH po kapkách. Výsledný roztok je čirá, vysoce opalescentní kapalina..

Pankreatický hydrolyzát. Pankreatinum (300 mg) se smíchá s 5 ml 2 kaseinového roztoku v 0,01 N KOH při 40 ° C po dobu 40 minut. Výsledný roztok pro přípravu enzymu se přidává do velké části alkalického roztoku kaseinu ve třech stejných dávkách každé 3 hodiny. Po přidání poslední části enzymu se roztok míchá dalších 15 hodin při 40 ° C a pH 8.

Ošetření pepsinovým hydrolyzátem pepsinem. Na konci pankreatické hydrolýzy se roztok okyselí 2 n kyselina sírová za intenzivního míchání na pH 2. Pepsin (300 mg) se rozpustí za míchání v 5 ml vody a zavede se do okyseleného hydrolyzátu ve třech stejných dávkách každé 3 hodiny. Po přidání poslední části enzymu se reakční směs míchala dalších 15 hodin při 40 ° C a pH 2.

Na konci hydrolýzy se k ní po kapkách přidá nasycený vodný roztok hydroxidu barnatého na pH 7. Sraženina vytvořeného síranu barnatého se oddělí odstředěním (5700 g, 5 ° C, 10 minut) a odstraní se. Supernatant se koncentruje na objem 150 ml, koncentrovaný hydrolyzát se lyofilizuje. Lyofilizovaný enzymatický hydrolyzát kaseinu je bílý amorfní prášek, snadno rozpustný ve vodě. Výtěžek 28,5 g (95).

Získání enzymatického hydrolyzátu sójového proteinu

Izolace sójového proteinu. Semena sóji (375 g) se rozdrtí v elektrickém mlýně, smísí se s 1 1 petroletheru, míchá se jednu hodinu při 20 ° C, sraženina se oddělí odstředěním (5700 g, 10 ° C, 5 minut). Odmaštění sójové mouky se opakuje ještě dvakrát, poté se suší na vzduchu. Výtěžek odstředěné mouky je 300 g (80). Výsledná sójová mouka se intenzivně míchá se 3 litry destilované vody po dobu jedné hodiny při 20 ° C..

Část, která se nerozpustila, byla oddělena centrifugací (5700 g, 10 ° C, 30 minut) a vysrážena, supernatant byl okyselen po kapkách 0,1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 4,5 za míchání a ponechán po dobu 1 hodiny při 20 ° C. Sraženina byla oddělena centrifugací (5700 g, 10 ° C, 10 minut), promyta studenou vodou (3 x 100 ml), supernatant a promývací kapaliny byly odstraněny. Sraženina byla smíchána s 0,5 1 vody, po kapkách byl ke směsi přidán 0,1 N KOH na pH 8, vyčištěno centrifugací (5700 g, 10 ° C, 30 minut). Supernatant byl okyselen 0,1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH 4,5, směs byla míchána po dobu jedné hodiny při 20 ° C. Reprecipitovaný protein byl separován centrifugací (5700 g, 10 ° C, 30 minut), promyt studenou vodou (3 x 100 ml) a lyofilizován. Výtěžek lyofilizovaného proteinu je 30 g (10).

Příprava 2. roztoku sojového proteinu. Lyofilizovaný protein (30 g) byl míchán při 40 ° C s 1500 ml 0,01 N roztoku KOH po dobu 3 hodin. PH roztoku bylo udržováno přidáním po kapkách 0,1 N KOH do osmi. Potom se roztok zahřívá ve vodní lázni (90 až 95 ° C, 30 minut) a ochladí se na teplotu místnosti.

Zpracování výsledného roztoku pankreatinem. Pankreatin (1 g) se rozpustí v 5 ml 2 roztoku sojového proteinu za míchání po dobu 40 minut. Výsledný roztok byl přidán ve třech stejných dávkách k hlavnímu objemu roztoku sojového proteinu každé 3 hodiny. Enzymatická hydrolýza trvá 48 hodin (40 ° C, intenzivní míchání).

Ošetření pepsinovým hydrolyzátem pepsinem. Na konci hydrolýzy pankreatu, 2N roztoku kyseliny sírové, se pH hydrolyzátu upraví na dva. Potom se 300 mg pepsinu rozpustí v 5 ml vody a přidá se ve třech stejných dávkách k hydrolyzátu sójového proteinu každé 3 hodiny. Doba hydrolýzy je 24 hodin při pH 2, 40 ° C za intenzivního míchání.

PH roztoku bylo upraveno na pH 7 přidáním nasyceného vodného roztoku hydrátu oxidu barnatého. Sraženina byla odstraněna centrifugací (5700 g, 10 ° C, 10 minut), supernatant byl lyofilizován.

Lyofilizovaný enzymatický hydrolyzát sójového proteinu je nažloutlý amorfní prášek, rozpustný ve vodě. Výtěžek - 20 g (66).

Oba přípravky enzymatických proteinových hydrolyzátů jsou skladovány v hermeticky uzavřené skleněné nádobě při 5 ° C po dobu až 12 měsíců.

Získání směsi lipidů

V minimálním množství sírového etheru se rozpustí 1 g cholesterolu ve směsi s 5 g sojového oleje v 5 g slunečnicového lecitinu. Sírový ether se odpaří při teplotě vodní lázně ne vyšší než 40 ° C. Směs může být skladována při 5 ° C po dobu jednoho roku..

Získání extraktu z kvasinek

1,8 kg pivovarské kvasnicové biomasy se oddělí od živného substrátu odstředěním (5700 g, 4 ° C, 20 min).Saccharomyces cerevisiae) a dvakrát promyta studenou destilovanou vodou. Autolýza se provádí ve 2,7 1 vody při 37 ° C (poměr biomasy kvasinek a vody je 1: 1,5) po dobu dvou dnů. Získaný autolyzát se odstředí (5700 g, 4 ° C, 20 minut), filtruje se přes bakteriální filtr a lyofilizuje. Výtěžek lyofilizovaného extraktu je 10% hmotnostních surového droždí.

Lyofilizovaný sušený kvasnicový extrakt je hnědý hygroskopický amorfní prášek, rozpustný ve vodě beze zbytků. Skladovatelnost při 5 ° C - nejméně 12 měsíců.

Získání extraktu z pšeničných klíčků

330 g pšeničných klíčků se rozdrtí v elektrickém mlýně, smísí se s 0,9 1 petroletheru a míchá se 2 hodiny při 20 ° C. Sraženina byla oddělena centrifugací (5700 g, 4 ° C, 10 min). Odmaštění embryí se opakuje ještě dvakrát, poté se suší na vzduchu. Výtěžnost beztukové mouky 100 g (30,3).

100 g beztukové mouky z pšeničných klíčků (poměr mouka k vodě - 1:10) se smíchá s destilovanou vodou a míchá se další 4 hodiny při teplotě 20 ° C. Sraženina byla oddělena odstředěním (5700 4 ° C, 20 minut), a poté znovu extrahována vodou (poměr mouky k vodě - 1: 5). Promývací voda se spojí a lyofilizuje. Výtěžek lyofilizovaného extraktu z pšeničných klíčků je 41 g (41).

Lyofilizovaný extrakt pšeničných klíčků je bílý amorfní prášek, snadno rozpustný ve vodě. Skladovatelnost při 5 ° C - nejméně 12 měsíců.

Příprava kultivačních médií

Středa 1. V 60 ml destilované vody se rozpustí 80 mg NaH2P04 x 2H20, 6 g sacharózy nebo potravinového cukru a 4,24 g kvasnicového extraktu. Směs byla udržována při teplotě místnosti po dobu 3 hodin, poté bylo v ní rozpuštěno 4,32 g extraktu z pšeničných klíčků, 4,8 g peptonu, 0,25 ml 20% roztoku cholinchloridu (50 mg), 1 ml roztoku vitaminu B12. 0,004 mg), 100 mg vitamínu C, 24 mg barviva (neutrální červená), 120 mg emulgátoru (tween-80) a 120 mg směsi lipidů. Celkový objem živného média se upraví destilovanou vodou na 120 ml.

Po přidání každé složky se směs důkladně protřepe. Konečné míchání se provádí za použití elektrického homogenizátoru (8000 ot / min / min, 2 min). Homogenizované růstové médium se filtruje přes skleněný filtr Schott č. 3. Hotové médium se balí do skleněných ampulí, uzavře se a skladuje se při teplotě minus 10 ° C. Přípustná doba skladování za těchto podmínek není delší než 6 měsíců.

Ve středu II a III. Připravuje se stejným způsobem jako médium I, ale místo peptonu se přidá potřebné množství enzymového hydrolyzátu kaseinu..

Středa IV. Vzorky minerálních solí se rozpustí ve 25 ml roztoku vitaminu B2 (1 mg): K2HP04 × ZN20 - 160 mg, MgS04 x 7H20 - 50 mg, NaH2P04 × 2H2O - 80 mg a 20 mg inositolu. Poté se přidají předem připravené vodné roztoky vitamínů - 1 ml roztoku směsi kyseliny nikotinové a pantothenátu vápenatého (2 mg každý), 1 ml roztoku směsi vitamínů B1 a B6 (0,5 mg každý), 1 ml roztoku biotinu (0,04 mg) ), 1 ml roztoku vitaminu B12 (0,004 mg), 54 ml roztoku kyseliny listové (0,5 mg), 0,25 ml 20. roztoku cholínchloridu (50 mg) a 1 ml roztoku FeS04 × H20 (5 mg).

Ve výsledné směsi minerálů a vitamínů se rozpustí 15 g sacharózy nebo potravinového cukru, 5 g enzymu kaseinového enzymatického hydrolyzátu, 5 g enzymatického hydrolyzátu sójových bílkovin, 100 mg vitamínu C a 24 mg neutrálního červeného barviva. Potom se ke směsi přidá 120 mg Tween-80 a 550 mg směsi lipidů. Celkový objem byl upraven destilovanou vodou na 120 ml. Směs se míchá, filtruje a skladuje stejným způsobem jako předchozí média..

Živná média jsou emulze se měrnou hmotností asi 1,075 g / cm3, nesvrstvená během dne při 5 ° C.

Výroba obalů kapslí

Složení skořápky se připraví následujícím způsobem: 59,4 parafinu a 39,6 včelího vosku se roztaví v kovové misce na elektrickém sporáku při 110 až 115 ° C, poté se přidá 1 kyselina olejová. Roztavená hmota se filtruje vrstvou bavlněné vlny, zabalí se a uloží do kovové nádoby chráněné před prachem. Vytvrzený materiál skořepiny je žlutá amorfní hmota s teplotou tání 85 až 90 ° C.

Při hromadné výrobě běžných šněrování je vhodné vyrábět živná média nebo jejich složky a skořepiny tobolek centrálně ve specializovaném podniku.

Technika ředění šněrování na mikroenkapsulovaném živném médiu

Pěstování krajek na mikroenkapsulovaných živných médiích a na jakékoli jiné formě potravin zahrnuje následující hlavní procesy: obsah imago, sběr vajec laceworm, inkubace vajec, příprava a mikroenkapsulace umělých živných médií, kultivace larev, dospělý hmyz..

Obsah hmyzu pro dospělé a sběr vajec. Imagin je obsažen ve válcových klecích o průměru 20 cm a výšce 10 cm. Stěny jsou vyrobeny z tenkého vinylového plastu o tloušťce 3-4 mm nebo jiného vhodného materiálu. Spodní část klece je gáza složená do dvou vrstev a na krytu je tmavý hustý papír. Spodní část a kryt náplně jsou upevněny gumovým kroužkem.

40. autolyzát pivovarských kvasnic a medu s pylem se používá jako krmivo pro dospělé, což pomáhá zvyšovat plodnost dospělých.

Autolyzát a med se nanášejí na jednotlivé kousky pěnové gumy o rozměrech 30x20x5 mm, které se poté zavěsí do klecí. Dospělí získaní během reprodukce laboratorní populace by měli být krmeni pouze medem a poté autolyzátem medu a kvasinek po dobu prvních čtyř až pěti dnů po znovuzrození..

V jedné kleci je drženo asi 100 párů hmyzu. Plodnost jedné ženy s takovým krmením a hustotou je v průměru 300 vajec na období snášky vajec (20–25 dní). krmení dospělých a sběr vajec se provádí obecně přijímanými metodami nejméně jednou denně. Klece s dospělým hmyzem obsahují při 20-25 ° C a 70-80 relativní vlhkosti ve speciální místnosti nebo krabici.

Inkubace vajec. Vejce z krajky získaná během jednoho dne se rozptýlí v Petriho miskách a umístí se do termostatu, ve kterém se automaticky udržuje konstantní teplota 25 ± 1,5 ° C a relativní vlhkost 75 až 80 ° C. V termostatu jsou dodatečně instalovány zářivky a zařízení pro sledování denního světla. Takový termostat se také používá k výchově larev a zachování imaga..

Současně s inkubací vajíček začnou připravovat živná média a zapouzdřit je..

Příprava a mikroenkapsulace kultivačního média. Technologie přípravy kultivačních médií je uvedena výše. Mikroenkapsulace se provádí na speciální instalaci, jejíž schéma je uvedeno na obr. 3.

Princip činnosti zařízení je následující: ochlazené živné médium z nádrže 1 vstupuje pod tlakem do vnitřního kanálu zapouzdřovací jednotky 2. Současně z nádrže 3 vstupuje roztavený plášťový materiál do mezery mezi vnitřním a vnějším kanálem jednotky 2. Potřebné teplotní podmínky jsou udržovány v nádržích 1 a 3, v napájecích systémech pro plášť 4 a živné médium 5 pomocí ultra-termostatů 6 a 7. Potřebný tlak média a obalu je vytvářen pomocí redukčního ventilu 8 a válce se stlačeným dusíkem 9. V zapouzdřovací jednotce 2 je dosaženo efektu tvorby dvou kapalin. proud pod vlivem povrchového napětí a teplotních kapek se rozdělí na jednotlivé kapsle s živným médiem. Kapsle po pádu ztuhnou a jsou shromažďovány v kontejneru 10.

Optimální provozní režim instalace: tlak v systému je 4,5 kg / cm2, teplota média je 8-12 ° C a teplota pláště je 85-90 ° C. Výsledné mikrokapsle jsou kulovitého tvaru, s průměrem 400 až 600 mikronů, tloušťkou skořepiny 15 až 20 mikronů. Obsah živného média v mikrokapslích je nejméně 75 až 80 z celkové hmotnosti. Práce na instalaci s mikroenkapsulací živného média se provádějí podle pokynů pro jeho použití.

Mikrokapsle se fixují na skleněné desky lepidlem, což je pátý vodný roztok polyvinylalkoholu s přídavkem dusičnanu stříbrného jako antiseptika.

Lepidlo připravte následujícím způsobem: 50 g práškového polyvinylalkoholu se rozpustí ve skleněné baňce se 700 ml destilované vody (teplota vodní lázně 70 až 80 ° C). Připravený roztok polyvinylalkoholu se ochladí na teplotu místnosti a do něj se zavedou 2 ml předem připraveného 0,05 roztoku dusičnanu stříbrného. Poté se celkový objem upraví na 1000 ml. Lepidlo může být skladováno v uzavřené nádobě při teplotě 3-7 ° C po dobu dvou měsíců. Skleněné desky s mikrokapslemi nalepenými v jedné vrstvě a umístěné v exsikátorech mohou být skladovány v lednici po dobu 10-12 dní při teplotě 3-7 ° C a relativní vlhkosti 70-90 (v exsikátorech).

Seznam materiálů nezbytných pro přípravu kultivačních médií a obalových médií tobolek:

1. Peptone.
2. Kasein Enzymatický Hydrolyzát.
3. Enzymatický hydrolyzát sójového proteinu.
4. Extrakt pšeničných klíčků.
5. Kvasnicový extrakt.
6. Sacharóza.
7. Hydratovaný lisovaný sójový olej.
8. Slunečnicový lecitin.
9. Cholesterol.
10. Cholinchlorid.
11. Kyselina askorbová.
12. Kyanokobalamin (B12).
13. Kyselina nikotinová.
14. Pantothenát vápenatý.
15. Thiaminchlorid.
16. Chlorid pyridoxinu (B6).
17. Riboflavin (B2).
18. Kyselina listová.
19. Biotin.
20. Inositol.
21. Fosforečnan sodný monosubstituovaný.
22. Fosforečnan draselný disubstituovaný.
23. Síran hořečnatý.
24. Oxidovaný síran železitý.
25. Barevně neutrální červená.
26. Twin 80.
27. Parafinový vosk.
28. Včelí vosk.
29. Kyselina olejová.
30. Polyvinylalkohol.
31. Methylester kyseliny P-hydroxybenzoové.

Larva Care. Líhnutí a vývoj larev se provádí ve specializovaných klecích, které se skládají ze dvou desek o velikosti 18–24 cm a mezi nimi mezerou mezi papírovými buňkami.

Papírové štítky jsou předem dezinfikovány ponořením do alkoholového roztoku metabenu (methylparaboxybenzoová kyselina) a kyseliny sorbové (1 g metabenu a 2 g kyseliny sorbové se rozpustí v 1 litru ethylalkoholu). Roztok je připraven předem a uložen v lednici v misce se zemní zátkou. Po zpracování se chlopně suší několik hodin na vzduchu.

Po třech dnech uchovávání v termostatu jsou vejce z krajky rovnoměrně rozptýlena po buňkách poutek rychlostí jednoho nebo dvou vajec na buňku. Krajky jsou umístěny zpět do termostatu, kde je udržováno denní světlo 16 hodin. Po zahájení líhnutí larev se horní deska klece nahradí deskou s umělým zapouzdřeným živným médiem. Pro vychovávání larev od okamžiku znovuzrození do prvního moltu stačí vyměnit talíř s jídlem jednou (dva až tři dny po znovuzrození). Výtěžek larev druhého stupně použitých pro hromadnou produkci ve skleníku je 60-70.

Bylo zjištěno, že za účelem získání plnohodnotného dospělého hmyzu a zvýšení jeho výnosu je nutné krmit larvy prvního věku vajíčky zrnnice a potom larvy druhého a třetího století, aby se kultivovaly na umělém mikroenkapsulovaném živném médiu IV, které nejvíce uspokojuje potřeby krmení larvami těchto století. Talíře se zapouzdřeným jídlem se mění stejným způsobem jako v prvním věku, jednou za dva až tři dny. Spotřeba vajec zrnního můra při tomto způsobu rozmnožování populace je pouze 8-10 z celkového požadavku na krmivo. Pro odchov 1 000 larev prvního věku je nutné utratit asi 35 g umělého krmiva (střední I-III), pro chov larev druhého a třetího století při reprodukci populace - 60–70 g (střední IV).

Získání dospělého hmyzu. Papírové štítky s kokony šest až sedm dní po odběru larev se přenesou do dospělých klecí. K oživení dospělého hmyzu dochází od osmého do devátého dne. Výtěžek normálně formovaných dospělých dosahuje 70. Hmyz, který létá, je krmen, jak je uvedeno výše. Vejce obvykle začíná šest až osm dní po znovuzrození imaga..